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关于SRM1649b标准品的纯度测定,教你几招

发表时间:2020-11-28      点击次数:605
   SRM1649b标准品作用于皮肤角质形成细胞HaCaT细胞及皮肤成纤维细胞(NHDF),检测分析其老化相关分子标志、信号通路的分子及基因表达水平,旨在探索PM2.5的空气颗粒性污染物中的多环芳烃化合物是否引起正常人表皮角质形成细胞及皮肤成纤维细胞老化的作用,明确多环芳烃化合物引起皮肤细胞老化的具体分子机制。
  纯度测定:
  1、配同等浓度的溶液,用已知含量的标准品标定自己纯化标准品的纯度。SRM1649b标准品经MS离子化后,检测的主要色谱峰即为目标化合物的色谱峰,水分、重金属、其他结构的杂质即使保留时间一样也不会出峰干扰,结果比较可靠。
  2、LC-MS进样后检测总离子流,有机杂质可以产生色谱峰,该色谱峰在保留时间上与目标化合物色谱峰的保留时间会有差别,从而可以观察标准品的纯度问题。一些在DAD上不响应的杂质,在MS上会出峰,从而使测定的结果更准确。但也存在一个问题,不同化合物离子化效率不同,同样的浓度会产生不同的峰面积。
  3、LC-MS可以测定SRM1649b标准品的纯度,但必须有对照品进行比较,用已知含量的标准品外标法确定自己标准品的量值,然后换算成纯度,属于外标法定量的一种,主要能避免DAD测定纯度过程中杂质带来的干扰。
  其实使用LC/MS技术也不能*保证准确测定纯度,LC/MS测定由于会受所采用离子化技术的限制。样品中某些杂质可能在所使用离子化技术下不能离子化或者离子化效率很低,导致该杂质不能检测到,测定纯度无法实现,当然如果所测杂质和主成分相关,一般可采用与主成分相同的离子化方法,结合适合的色谱分离方法测定。
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